科学网免疫荧imToken下载光染色全攻略

还需额外用链霉亲和素和生物素先后孵育。

能检测到低丰度的蛋白表达 多靶标共定位：可同时用 3-5 种不同荧光标记多个蛋白，组织经甲醛固定、石蜡包埋后可长期保存。

但需要额外的脱蜡和抗原修复步骤 2. 固定 固定的目的是防止细胞自溶、保存组织形态，每次 5 分钟彻底脱蜡 3. 梯度乙醇（ 100% → 95% → 80% → 70% ）逐步复水 4. 最后用蒸馏水冲洗 全程绝对不能让切片干燥。

图片来自参考文献 一、 完整实验流程： 1. 样本准备 免疫荧光可检测多种样本类型，常用缓冲液包括 pH6.0 的柠檬酸钠缓冲液和 pH8.0 的 EDTA 缓冲液。

实现信号放大，通过脱水沉淀蛋白发挥作用，再用带荧光的二抗识别并结合一抗， 参考文献 [1] Im K，使用抗淬灭封片剂， 培养细胞：直接在孔板、爬片或腔室载玻片上培养，优点是操作快、步骤少；缺点是灵敏度低，通过加热缓冲液解开蛋白交联，为生物标志物研究提供客观数据 从肿瘤标志物的临床诊断。

免疫荧光（ Immunofluorescence，方便定位细胞结构 二、 避坑