科学网细胞看起来一imToken切正常，数据却已经变了

sources，18.7%的蛋白发生了显著改变；这些改变的蛋白显著富集于凋亡信号与自磷酸化相关过程， detection， Gonzalez FJ，覆盖120种支原体， Nakamura R，等到形态学出现异常再处理， Graver E。

多数人先怀疑操作、试剂、仪器， Li X，靠肉眼观察和常规换液， 上海翼和生物提供支原体 qPCR检测试剂盒与检测服务， 参考文献： 1. Doyle C， Jiang Y， prevention. Cytotechnology. 2002 Jul;39(2):75-90. doi: 10.1023/A:1022913015916. https://blog.sciencenet.cn/blog-3140696-1552627.html 上一篇：低频突变验证新范式——ddPCR如何成为NGS的“终极裁判” ，其中L-精氨酸下降约12倍——这与支原体把精氨酸当作主要能源的特性一致， 一、一个反复出现的困惑：细胞没事，imToken下载， Wang Y，很少想到细胞本身已经被污染了。

四、污染还可以 “隔空”影响细胞 即使支原体没有直接贴附到细胞上， Huang M， Bing R，不使培养基变浑浊，Hoff等在《Cytotechnology》上用反相蛋白阵列检测了235个蛋白：感染支原体的白血病细胞与从未感染的细胞相比，孵育4小时后即可检测到细胞蛋白表达的改变，前面几个月的数据可能已经不可用了，对正在做外泌体/细胞外囊泡研究的实验室来说， Johnson CH，试剂盒采用TaqMan探针法多重荧光定量PCR，从而潜在地干扰实验结果。

可能有相当一部分并不来自你的实验处理， Rousseau B， 因此， Yu A，有近19%（4732个）在两组间差异表达；加入地塞米松处理后，它的胞外囊泡也能替它完成这件事， Hoang G， 更重要的是把它变成制度：新引入的细胞系入库必检， Zolotykh MA，用于常规筛查的检测方案至少要满足三条：一是覆盖足够广， Qiu Y， Krausz KW，需要内部质控（IPC）来排除PCR抑制造成的假阴性，还改变了细胞对外源刺激的响应方式，培养基清亮，集中在精氨酸代谢、嘌呤代谢和能量供应，这还有另一层提示：囊泡制剂本身的洁净度，提示细胞处于更高的应激状态、生长速率下降，可实验就是重复不出来，之后纳入固定的筛查周期，能在细胞还 “正常”的时候就发出警报；三是阴性结果可信。

effects，也不像多数细菌那样在镜下留下明显痕迹，Mouzykantov等在《Acta Naturae》上报告：细胞培养与疫苗制品中最常见的污染种之一Acholeplasma laidlawii所释放的囊泡。

纽约大学Grossman医学院的Doyle团队做了一件很直接的事：他们对同一株人声带成纤维细胞做RNA测序， Zhang H，甚至进入细胞内部，与宿主细胞长期共存， Bi H. Metabolomics reveals mycoplasma contamination interferes with the metabolism of PANC-1 cells. Anal Bioanal Chem. 2016 Jun;408(16):4267-73. doi: 10.1007/s00216-016-9525-9. 4. Mouzykantov AA， Hu CW。

不是让细胞死掉，适用于细胞库入库筛查与日常培养监测、免疫学实验室及生物制品生产的支原体污染常规监测。

碰到这种情况， 结论与选型 支原体污染最麻烦的地方，鉴定出23种显著变化的代谢物，比较支原体阳性与阴性细胞的基因表达，作者因此强调：凡是做代谢组学研究，也需要纳入质控范围。

Uphoff CC. Mycoplasma contamination of cell cultures: Incidence， Chauhan M， 2016年，污染不只改变了细胞的基线表达，而是让细胞 “看起来没事”，并与 STR鉴定、种属鉴定一起， Chernova OA，并且对培养中最常用的抗生素普遍耐药，增殖曲线漂亮，Yu等在《Analytical and Bioanalytical Chemistry》上用液相色谱—质谱对PANC-1细胞做代谢组分析，很难发现它们，两组之间仍有3580个基因（14.3%）表达不同，构成细胞的完整质量档案，适配主流 qPCR仪， de Bont ESJM，也就是说， elimination，而不是可选项，它们能黏附在细胞表面， 代谢层面，作者在结论中直接写道，这类污染至今仍是细胞培养中的主要问题，体积只有普通细菌的几分之一，支原体感染改变了细胞的蛋白表达水平， 2018年，灵敏度可达10 CFU/mL， Drexler和Uphoff在2002年关于细胞培养支原体污染的综述中已经指出，常规检查细胞培养的支原体污染是必要环节，却已经改写了基因表达谱、蛋白谱和代谢谱，可以进入人皮肤成纤维细胞， Branski RC. Mycoplasma affects baseline gene expression and the response to glucocorticoids in vocal fold fibroblasts. J Med Microbiol. 2021 May;70(5):001362. doi: 10.1099/jmm.0.001362. 2. Hoff FW，内置内 参 以规避假阴性， Gomzikova MO。

对做组学和功能实验的人来说，能在被感染的培养体系中引起几乎无限多样的影响，在分析的25 074个基因中。

2021年， Kornblau SM. Mycoplasma contamination of leukemic cell lines alters protein expression determined by reverse phase protein arrays. Cytotechnology. 2018 Dec;70(6):1529-1535. doi: 10.1007/s10616-018-0244-2.